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產(chǎn)品概述
白血病抑制因子（或稱LIF）是一種高度糖基化、大小為38-67 kDa的多肽，最初被確定是小鼠M1髓性白血病細胞系的增殖抑制劑和分化誘導劑。成熟的LIF分子片段由180個氨基酸殘基構(gòu)成，多個潛在的N-連接和O-連接糖基化位點加上六個保守的半胱氨酸殘基形成三個分子內(nèi)的二硫鍵架橋結(jié)構(gòu)。在氨基酸序列上，成熟小鼠和人具有78%的同源性，這種同源性可能表明LIF生物學上具有高度的保守性，但是據(jù)報道在人和小鼠的LIF蛋白和LIF受體方面仍然存在顯著的差異性?；贚IF的螺旋形結(jié)構(gòu)，其被認為是細胞因子IL-6家族的成員。已知表達LIF的細胞包括激活的T細胞、單核細胞、成骨細胞、星形膠質(zhì)細胞、角質(zhì)形成細胞、肥大細胞，成纖維細胞。已有報道表明在許多生理過程中均有LIF的產(chǎn)生， 包括生長發(fā)育、造血、骨代謝、炎癥等。
產(chǎn)品原理
本實驗采用雙抗體夾心ELISA法?？谷薒IF單抗包被于酶標板上，標本和標準品中的LIF會與單抗結(jié)合形成免疫復合物，游離的成分被洗去；加入生物素化的抗人LIF抗體，生物素化抗人LIF抗體與酶標板上結(jié)合的標準品或樣本中的LIF結(jié)合而形成免疫復合物，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化物酶標記的親合素，親合素與生物素特異性結(jié)合，游離的成分被洗去。加入顯色底物（顯色劑），若反應(yīng)孔中有LIF，辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑變藍，加終止液變黃。在450nm處測OD值， LIF濃度與OD450值之間呈正相關(guān)，可通過繪制標準曲線求出標本中LIF濃度。